今天我们来聊聊玻璃过滤器,以下6个关于玻璃过滤器的观点希望能帮助到您找到想要的新能源资讯。
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在摄影圈内,人们普遍认为日落照片是每个人在旅行或度假时想要得到的照片之一。没有什么能比完美的日落照片更能让人感受到绝对的宁静。
日落图片的内在问题
问题是, 这些镜头大多无法准确地展示日落的真实样子。尤其是在日落时, 大多数人 (实际上在场的人) 说, 在拍摄的时候, 日落看起来更美。
为什么总是这样?为什么人们采取的日落镜头从来没有完全捕捉到那一刻的精髓呢?为什么他们从来没有真正达到现实的事件, 因为它已经被描绘的人的脑海中,
当他们实际上是在拍摄?
日落照片最大的挑战在于,当您使用相机拍摄时,您的相机实际上无法像您的眼睛一样看到灯光。你的眼睛可以看到比相机更宽的光强范围。
相机具有可以捕捉的光线范围更窄的光线范围,也可以捕捉非常明亮的色调与极其暗的色调范围。日落时发生的挑战是前景中的物体,例如,如果您正在拍摄山脉,则是海洋或山谷,比背景(这是天空)暗得多。即使在太阳下山的时候,你知道天空仍然很亮,所以天空仍然比前景亮得多。
现在的问题是,照相机将会使天空曝光过度,而你在日落照片中不会有任何颜色。它也可能会暴露前景,使前景完全是黑色的,然后天空就会被适当地暴露出来。无论你分析哪一种情况,这两种情况都不利于捕捉此刻的精神。这是大多数日落照片失败的地方。
使用 HDR 的组合
第一种校正相机效果的方法是使用称为HDR摄影的过程。HDR是高动态范围摄影的缩写。对于一些摄影师来说,这可能不是增强或校正的首选方法。这种使用这种方法犹豫不决的原因是,它使得照片看起来几乎像世界末日的风景。这是个人品味和风格的问题。这并不是说在任何情况下,视觉强度的范围都会受到损害或者性质较差。事实上,在大多数情况下,这些照片拥有辉煌灿烂的夜光范围。尽管如此,一些摄影师并不热衷于高动态范围摄影。
使用渐变中性密度的组合
还有另一种技术可以用来校正日落图片。此方法涉及使用分级中性密度滤波器。这听起来可能很复杂, 但不是。该方法涉及使用一个透明的玻璃过滤器,
具有稍暗的顶部和明确的底部。还有一个非常狭窄的范围内的玻璃褪色。这种玻璃过滤器可以排在地平线上, 所以黑暗部分可以让相机拍摄正常曝光,
使天空可以适当地暴露与前景。
这是一个矫正外围设备的工作。使用分级中性密度过滤器, 你可以得到的全范围的光, 是可见的, 你的眼睛可以看到, 而你实际上是在拍摄。
我们以上面的照片为例,这张照片是在太阳沉入海地地平线以下的同一时刻拍摄的。过滤器有助于平衡天空的亮度和前景的黑暗。请注意,过滤器的使用如何给天空带来如此多的颜色和对比度细节。
玻璃过滤器,它真的没有添加任何额外的颜色,只是一个中性密度灰色的阴影。用玻璃滤镜拍摄的照片中所看到的颜色完全是一种自然的颜色,玻璃滤镜没有添加任何额外的颜色。
使用偏光滤镜
偏光滤镜使相机能够以与眼睛相同的容量看到日落图片的风景,并减少照片中出现的反射和眩光量,如此处示例所示。
此外,它还允许相机在最终图像中捕捉大范围的色彩和其他细节。这对于任何日落而言都是一项出色的技术。
为了使太阳成为照片的焦点,强烈建议使用广角焦距来突出显示效果。这些总体考虑点可以在日落照片中产生令人印象深刻的结果。
玻璃纤维是常见的精密过滤器滤材之一,玻璃纤维价格低,过滤精度高。玻璃纤维滤芯主要用在油过滤、空气过滤、水过滤等过滤行业。除去液体或者空气中少量固体颗粒的,可保护设备的正常工作或者空气的洁净,当流体进入置有一定规格滤网的滤芯后,其杂质被阻挡,而清洁的流物通过滤芯流出。
DPC精密过滤器玻璃纤维滤材的等级
根据纤维直径大小,玻璃纤维有如下级别的区分:
粗体纤维:df=10 ~ 300μm;弹性纤维:df=35 ~ 100μm
粗纤维:df=12 ~ 35μm;细纤维:df=3 ~ 12μm;
高细纤维:df=0.8 ~ 3μm;超细纤维:0.5 ~ 0.8μm
微细纤维:df< 0.5μm。
1.重力过滤 即滤液是在本身重力作用下透过过滤介质而被排出; 2.加压过滤 即利用矿浆或真空压缩机对矿浆施加压力,迫使液体透过过滤介质; 3.真空过滤 利用真空泵造成的真空吸力使滤液透过过滤介质而被吸出; 4.离心过滤 利用离心力作用,排除矿浆中的液体; 5.磁与真空过滤相结合 利用磁力和真空吸力,迫使滤液透过过滤介质而被排出.主要用于磁性产品. 过滤的一般分类 过滤的分类 1)按过滤过程中杂质性质的变化可以分为物理过滤和化学过滤。袋式过滤系统属于物理过滤方式,是一种清除液体中固体或胶状颗粒的死端过滤方法。 2)按过滤对象分为气体过滤与液体过滤:气体过滤主要是指去除气体中的油、水及其他颗粒杂质;我们所指的液体过滤主要是指固液分离,集中在物理过滤领域;除色和除味很多通过化学处理完成,因此不完全在我们所指的液体过滤范畴内, 但少量的除色除味工作可以通过我们活性碳滤袋吸附完成。 物理过滤的杂质截留机理: -机械截留作用:具有截留比它孔径大或孔径相当的微粒等杂质的作用,即筛分作用。 -物理作用或吸附截留作用:除了要考虑孔径因素外,还要考虑其它因素的影响,其中包括 吸附和电性能(比如静电)的影响。 -架桥作用:通过电镜可以观察到,在孔的入口处,微粒因为架桥作用也同样可以被截留。 -内部截留作用:这种截留是将微粒截留在膜的内部,并非截在膜的表面 液体过滤可分为深层过滤和绝对过滤 1)深层过滤是在过滤层的表面和内部进行拦截的过滤方式, 无纺布(又称不织布)内的不织纤维无规则地交织在一起,大的颗粒首先被拦截在无纺布的外面,小一点的渗透进去,但到一定深度又被拦截,更小一点的杂质进一步深入,最后通过的为小于某一尺寸大小的颗粒和少量大于这一尺寸的颗粒。 通常用于深度过滤的有聚丙烯、聚酯、NOMEX、聚四氟乙烯等材质的滤袋,无纺布等过滤耗材的内部组织结构、材质的厚度、纤维表面都会对深度过滤的拦截效率产生影响。 通常,这种过滤又被称为相对过滤,过滤精度往往是按照某一孔径的杂质的过滤效率之来定义的。不同公司对滤袋精度的测试方法和达到的过滤效率要求不尽相同,有的定义为80~85%、有的定义为50~70%。导致使用不同公司的同一精度的滤袋后,实际过滤效果也不同。山姆公司可以帮助选择合适精度的滤袋。 2)绝对过滤是采用表面拦截的过滤方式,大于某一尺寸的颗粒95-99.9%被拦截,小于此尺寸的颗粒全部通过。 通常用于绝对过滤的有聚丙烯、聚酯、尼龙等单丝或多丝及不锈钢过滤网等材质的滤袋。 单纤绝对过滤网具有良好的卸渣能力;多纤绝对过滤网具有高的强度及过滤胶体能力。 滤袋材质表面的孔径必须大小一致,纤维编织必须紧密牢固,材质接合后要求能承受较大压力,才能防止泄漏发生,严格保证绝对过滤的效果。 目前,尼龙袋可以达到25μm的绝对过滤精度,如果绝对过滤要求小于25μm,可以配合滤芯或其他滤袋来实现。 微孔滤膜预处理环境样品前处理水样 从事水质分析的工作者应该知道,除非将采到的水样马上进行分析,否则在水样贮存以前必须进行适当的预处理。预处理主要依据被测水样的不同要求而确定测定方法,过滤是常用的预处理方法。 1.水样预处理的必要性 在未过滤的样品中,由于颗粒物和溶解于样品中的其他物质之间的相互作用,有可能引起样品中重金属化学形态分布的变化。研究人员研究发现:重金属在沉积物与水的混合物中的吸附一解吸平衡时间是很快的,一般不超过三天,最大吸附发生在pH=7.5左右。采样后,溶液平衡的任何变化,颗粒物所提供的吸附部位都将为金属形态的迁移提供路径,而在某些条件下,解吸已吸附的金属是可能的。通常对于微量元素或有机分析,首先必须通过过滤或者离心将水样中的颗粒物质除去(如果测定颗粒物中的污染物成分,则需收集这部分样品),然后加入保护剂,水样盛放在没有污染的容器内,并贮存在合适的温度下,以防止有效成分的损失、降解或形态变化。 高的细菌浓度伴随着沉积物的存在同样也会导致水溶性金属形态的损失。细菌和藻类的生长包括光合成及氧化等作用将会改变水样中C02的含量因而导致pH值的变化,pH值的变化往往带来沉淀,改变螯合或吸附行为以及溶液中金属离子的氧化还原作用。由于贮存样品中的细菌生长和繁殖的不可预测性质,采样后的过滤越早越好。如果时间推迟至几个小时之后,样品最好冷冻保存或者加酸酸化以便抑制细菌的生长。 2.试验仪器选取 利用0.45μm的微孔膜可以方便地区分开溶解物和颗粒物,通过滤膜的过滤液中还可能含有0.1~0.001μm的微生物和细菌的胶粒以及小于0.001μm的溶解于水的组分。0.45μm的滤膜可以滤出所有的浮游植物和绝大多数的细菌。连续的过滤有时可能造成滤膜的堵塞,这时一般需要更换新膜或是采用加压过滤。 使用过滤仪器,应该注意仪器与溶液接触部分的材料,同时也要考虑过滤器的类型(真空还是加压)。玻璃过滤器使用橡胶塞子容易造成沾污,一般选择使用硼硅玻璃的真空抽滤系统。过滤以前,过滤器材应用稀酸洗涤,通常可以在1~3mol/L盐酸中浸泡。 未处理过的过滤膜表面极易吸附水中的镉和铅,但用来过滤河水时,未发现上述元素浓度的变化。利用未经处理的膜来过滤海水样品中的含汞样品,可能造成10%~30%的损失。然而使用处理过的玻璃纤维过滤,汞的损失可降低至7%以下。一般的滤膜使用前先用20mL 2mol/L HNO3洗涤,再用50~100mL蒸馏水冲洗。接收的烧杯或三角烧瓶必须用蒸馏水将酸冲洗干净。并将最初收集的10~20mL滤液去掉。对于海洋深水样的过滤。滤膜最好先用稀硝酸浸泡。 加压过滤或真空抽滤是通常使用的两种方法。加压过滤速度快,适用于过滤含有大量沉积物的河水水样,如果使用φ50mm、0.45μm膜过滤水样,速度大约在100mL/h左右,加压过滤通常使用超滤膜。 微孔过滤膜的选取 过滤时,使用前必须根据被滤介质的理化性质选用合适的微孔滤膜。作为微孔滤膜的材料有很多种,其性能又有所不同。常用微孔过滤膜有如下几种: (1) 水系微孔滤膜:一般用于纯水相的过滤。在过滤含有机相的混合溶剂时应尽量避免使用水系滤膜,以防滤膜被溶解,因为水系滤膜一般由纤维素类的材料制成。纤维素类膜材料的特点是亲水性好、成孔性好、来源广泛,但耐酸碱和有机溶剂能力差,抗蠕变性能差。水系滤膜系列包括:醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜、混酯膜再生纤维素膜、聚醚砜等。 (2) 有机系微孔滤膜:用于有机溶剂的过滤。常用有机系微孔膜:聚四氟乙烯膜(PTFE)、聚偏二氟乙烯膜(PVDF)、聚偏氟乙烯 (3) 混合滤膜过滤:一般用于水系、有机系通用。混合滤膜过滤:尼龙膜、改性的聚偏氟乙烯(改良亲水性)、聚四氟乙烯膜(改良亲水性)、聚偏二氟乙烯膜(改良亲水性)。脂肪族尼龙,有良好的亲水性,耐适当浓度的酸碱,不仅适用于含有酸碱性的水溶液,亦适用于含有有机溶剂,例醇类、烃类、醚类、酯类、酮类,苯和苯的同系物,二甲基甲酰胺,二甲基亚砜等等,是适用范围最广的微滤膜之一。
您好,很高兴为您解答问题。【摘要】 柴油颗粒过滤器DPF(黄色指示灯),发警告。请问对车有什么影响,可以继续开么?不处理的后果是怎样?【提问】 您好,很高兴为您解答问题。【回答】 您好,柴油的玻璃过滤器,它是一个收集过滤的,一个装机的,这个是国国6的一个装置在里面啊,如果你们没有有故障没有维修,他那里啊越来越多那个活力会堵塞排气管他那个动力会减弱,还有他的油耗也会变大。这个啊啊,如果没时间可以继续开的,如果有时间了尽快为售后或者维修站检修了。【回答】
楼主好! 实验八 培养基的制备与灭菌 一、目的要求1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法.2. 掌握培养基的配置方法.3. 掌握干热灭菌和高压蒸汽灭菌的操作方法.二、基本原理 正确掌握培养基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础.由于微生物种类及代谢类型的多样性.因而用于培养微生物的培养基的种类也很多,它们的配方及配制方法虽各有差异.但一般培养基的配制程序却大致相同.例如器皿的准备,培养基的配制与分装,棉塞的制作,培养基的灭菌,斜面与平板的制作以及培养基的无菌检查等基本环节大致相同.三、实验材料1. 药品:待配各种培养基的组成成分、琼脂、1mol/L的NaOH和HCl溶液.2. 仪器及玻璃器皿:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等.3. 其他物品:药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等.四、操作步骤(一)玻璃器皿的洗涤和包装1.玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净.将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中.用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净.移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗.洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用.2.灭菌前玻璃器皿的包装(1) 培养皿的包扎:培养皿由一盖一底组成一套,可用报纸将几套培养皿包成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌.包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用.(2) 图8-1 移液管的包扎移液管的包扎:在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内,并防止菌液等吸入口中.塞入此小段棉花应距管口约0.5cm左右,棉花自身长度约1~1.5cm.塞棉花时.可用一外围拉直的曲别针、将少许棉花塞入管口内.棉花要塞得松紧适宜,吹时以能通气而又不使棉花滑下为准.先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条,然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端,约成45℃角,折叠纸条包住尖端,用左手握住移液管身,有手将移液管压紧.在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来.上端剩余纸条,折叠打结,准备灭菌.(二)液体及固体培养基的配制过程1.液体培养基配制1) 称量:一般可用0.01g天平称量配制培养基所需的各种药品,先按培养基配方计算出各成分的用量.然后进行准确称量.2) 溶将称好的药品置于一烧杯中,先加入少量水(根据实验需要可用自来水或蒸馏水),用玻璃棒搅动,加热溶解.3) 定容:待全部药品溶解后,倒入一量筒中,加水至所需体积.如某种药品用量太少时,可预先配成较浓溶液,然后按比例吸取一定体积溶液,加入至培养基中.4) 调pH:一般用pH试纸测定培养基的pH.用剪刀剪出一小段pH试纸,然后用镊子夹取此段pH试纸,在培养基中蘸一下,观看其pH范围,如培养基偏酸或偏碱时,可用1mol/L NaoH或1mol/L HCl溶液进行调节.调节pH时,应逐滴加入NaOH或HCI溶液,防止局部过酸或过碱,破坏培养基中成分.边加边搅拌,并不时用pH试纸测试,直至达到所需pH为止.5) 过滤:用滤纸或多层纱布过滤培养基.一般无特殊要求时,此步可省去.2.固体培养基的配制 配制固体培养基时,应将已配好的液体培养基加热煮沸,再将称好的琼脂(1.5~2%)加入,并用玻棒不断搅拌,以免糊底烧焦.继续加热至琼脂全部融化,最后补足因蒸发而失去水分.(三)培养基的分装 根据不同需要,可将已配好培养基分装入试管或三角瓶内,分装时注意不要使培养基沾污管口或瓶口,造成污染.如操作不小心,培养基沾污管口或瓶口时,可用镊子夹一小块脱脂棉,擦去管口或瓶口的培养基,并将脱脂棉弃去.1.试管的分装取一个玻璃漏斗,装在铁架上,漏斗下连一根橡皮管,橡皮管下端再与另一玻璃管相接,橡皮管的中部加一弹簧夹.分装时,用左手拿住空试管中部,并将漏斗下的玻璃管嘴插入试管内,以右手拇指及食指开放弹簧夹,中指及无名指夹佐玻璃管嘴,使培养基直接流入试管内.装入试管培养基的量视试管大小及需要而定,若所用试管大小为15×150 mm时,液体培养基可分装至试管高度1/4左有为宜;如分装固体或半固体培养基时,在琼脂完全融化后,应趁热分装于试管中.用于制作斜面的固体培养基的分装量为管高1/5(约3—4mI),半固体培养基分装量为管高的1/3为宜.2.三角瓶的分装图8-2培养基的分装 用于振荡培养微生物时,可在250 m1三角瓶中加入50 m1的液体培养基;若用于制作平板培养基用时,可在250 m1三角瓶中加入150ml培养基,然后再加入3g琼脂粉(按2%计算),灭菌时瓶中琼脂粉同时被融化.(四)棉塞的制作及试管、三角瓶的包扎 为了培养好气性微生物,需提供优良通气条件,同时为防止杂菌污染,则必须对通入试管或三角瓶内空气预先进行过滤除菌.通常方法是在试管及三角瓶口加上棉花塞等.1.试管棉塞的制作制棉塞时,应选用大小、厚薄适中的普通棉花一块,铺展于左手拇指和食指扣成的团孔上,用右手食指将棉花从中央压入团孔中制成棉塞.然后直接压入试管或三角瓶口.也可借用玻璃棒塞入,也可用折叠卷塞法制作棉塞.制作的棉塞应紧贴管壁,不留缝隙,以防外界微生物沿缝隙侵入,棉塞不宜过紧或过松,塞好后以手提棉塞,试管不下落为准.棉塞的2/3在试管内,1/3在试管外.目前也有采用硅胶塞代替棉塞直接盖在试管口上.将装好培养基并塞好棉塞或硅胶塞的试管捆成一捆,外面包上一层牛皮纸.用记号笔注明培养基名称及配制日期,灭菌待用. 图8-3 棉塞的制作图8-4 正确与不正确的棉塞1.金属塞 2正确 3、4不正确 2.三角瓶棉塞制作通常在棉塞外包上一层纱布,再塞在瓶口上.有时为了进行液体振荡培养加大通气量,则可用8层纱布代替棉塞包在瓶口上,目前也有采用硅胶塞直接盖在瓶口上.在装好培养基并塞好棉塞或包扎八层纱布或盖好硅胶塞的三角瓶口上,再包上一层牛皮纸并用线绳捆好,灭菌待用.(五)培养基的灭菌培养基经分装包扎后,应立即按配制方法规定的灭菌条件进行进行高压蒸汽灭菌.(六)斜面和平板的制作1.斜面的制作将已灭菌装有琼脂培养基的试管,趁热置于木棒或玻棒上,使成适当斜度,凝固后即成斜面.斜面长度不超过试管长度l/2为宜.如制作半团体或固体深层培养基时,灭菌后则应垂直放置至凝固.2.平板的制作将装在三角瓶或试管中已灭菌的琼脂培养基融化后,待冷至50℃左右倾入无菌培养皿中.温度过高时,皿盖上的冷凝水太多;温度低于50℃,培养基易于凝固而无法制作平板.平板的制作应在火旁进行,左手拿培养皿,右手拿三角瓶的底部或试管,左手同时用小指和手掌将棉塞打开,灼烧瓶口,用左手大拇指将培养皿盖打开一缝,至瓶口正好伸入,倾入10~15mL培养基,迅速盖好皿盖,置于桌上,轻轻旋转平皿,使培养基均匀分布于整个平皿中,冷凝后即成平板.(七)培养基的灭菌检查灭菌后的培养基,一般需进行无菌检查.最好取出1~2管(瓶),置于37℃温箱中培养1~2天,确定无菌后方可使用.(八)无菌水的制备在每个250mL的三角瓶内装100mL的蒸馏水并塞上棉塞或硅胶塞.在每支试管内装4.5mL蒸馏水,塞上棉塞或硅胶塞.再在棉塞上包上一张牛皮纸,高压蒸汽灭菌.0.1MPa灭菌20~30min.五、实验内容1. 根据要求清洗各种玻璃器皿,并进行包扎.2. 根据要求配制各种培养基.3. 用电热鼓风干燥箱对玻璃器皿进行干热灭菌.4. 用高压蒸汽灭菌锅对所配各培养基灭菌.六、实验报告1. 简述移液管和培养皿的包扎注意事项.2. 简述配制培养基的基本步骤及注意事项.3. 为什么微生物实验室所用的移液管口或滴管口的上端均需塞入一小段棉花,再用报纸包起来,经高压蒸汽灭菌后才能使用?4. 为什么微生物实验室所用的三角瓶口或试管口都要塞上棉塞(硅胶塞)才能使用?5. 配制培养基时为什么要调节pH?6. 高压蒸汽灭菌为什么比干热灭菌要求温度低、时间短? 附录 灭菌技术一、目的要求了解消毒和灭菌的原理,并掌握各种灭菌方法的操作步骤.二、实验材料1. 仪器或其他用具:上述包扎的培养皿、试管、移液管等,电热鼓风干燥箱,高压蒸汽灭菌锅,微孔滤膜过滤器,0.22μm滤膜,注射器,镊子,玻璃涂棒.2. 培养基:上述配制的培养基及生理盐水三、基本原理在微生物实验中,需要进行纯培养,不能有任何杂菌污染,因此必须对所用器材、培养基和工作场所进行灭菌和消毒.灭菌是指杀死一定环境中的所有微生物,包括微生物的营养体、芽孢和孢子.实验室常用的灭菌方法包括直接灼烧、恒温干燥箱灭菌、高压蒸汽灭菌、间歇灭菌、煮沸灭菌等方法.这些方法的基本原理是通过加热使微生物体内蛋白质凝固变性,从而达到灭菌的目的.四、操作步骤(一)干热灭菌法干热灭菌是在电热干燥箱内利用高温干燥空气(160℃~170℃)进行灭菌,它是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌目的.此法适用于玻璃器皿如移液管、试管和培养皿的灭菌.培养基、橡胶制品、塑料制品不能采用干热灭菌.细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白质凝固就越快,反之含水量越小,凝固越慢.因此,与湿热灭菌相比,干热灭菌所需温度高(160℃~170℃),时间长(1~2h).但干热灭菌温度不能超过180℃,否则,包器皿的纸或棉塞就会烧焦,甚至引起燃烧.干热灭菌使用的是电热干燥箱(干燥箱).具体操作步骤如下:1. 装入待灭菌物品:将包好的待灭菌物品放入电热干燥箱内,关好箱门.堆积时要留有空隙,物品不要摆放得太挤,以免妨碍空气流通,灭菌物品不要接触电热干燥箱内壁的铁板、温度探头,以防包装纸烤焦起火.2. 升温:接通电源,打开开关,适当打开电热干燥箱顶部的排气孔,旋动恒温调节器,使温度逐步上升.当温度升至100℃时,关闭排气孔.在升温过程中,如果红灯熄灭,绿灯亮,表示电热干燥箱内停止加温,此时如果还未达到所需的160℃~170℃,则需要转动温度调节器使红灯亮,如此反复调节,直至达到所需的温度.3. 恒温:当温度升到160℃~170℃时,借助恒温调节器的自动控制,保持此温度2h.干热灭菌过程中,严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故.4. 降温:切断电源,自然降温.5. 开箱取物:待电热干燥箱内温度降到60℃以下后,才能打开箱门,取出灭菌物品.同时,应将温度调节旋钮调到零点,并打开排气孔.电热干燥箱内温度未降到60℃以前,切勿自行打开箱门,以免骤然降温导致玻璃器皿炸裂.(二)高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌是将物品放在密闭的高压蒸汽灭菌锅内,在一定的压力下保持15~30分钟进行灭菌.此法适用于培养基、无菌水、工作服等物品的灭菌,也可用于玻璃器皿的灭菌.将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅夹套间的水沸腾而产生蒸汽.待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中排尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸汽不能溢出,而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,获得高于100℃的温度,导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的.在相同的温度下,湿热灭菌的效果好于干热灭菌.有三点原因:在湿热灭菌中菌体吸收水分,蛋白质容易凝固变性,蛋白质随着含水量的增加,所需凝固温度降低;湿热灭菌中蒸汽的穿透力比干燥空气大;蒸汽在被灭菌物体表面凝结,释放出大量的汽化潜热,能迅速提高灭菌物体表面的温度,从而增加灭菌效力.实验室常用的灭菌锅有非自控手提式高压蒸汽灭菌锅和自控式灭菌锅,其结构和工作原理是相同的.本实验介绍的是非自控手提式高压蒸汽灭菌锅,自控式灭菌锅的使用可参考厂家说明书.具体操作步骤如下:1. 加水:首先将内层锅取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面没过加热蛇管,与三角搁架相平为宜.切勿忘记检查水位,加水量过少,灭菌锅会发生烧干引起炸裂事故.2. 装料:放回内层锅,并装入待灭菌的物品.注意不要装得太挤,以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果.装有培养基的容器放置时要防止液体溢出,三角瓶与试管口端均不要与桶壁接触,以免冷凝水淋湿包扎的纸而透入棉塞.3. 加盖:将盖上与排气孔相连的排气软管插入内层锅的排气槽内,摆正锅盖,对齐螺口,然后以对称方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气,并打开排气阀.4. 排气:打开电源加热灭菌锅,将水煮沸,使锅内的冷空气和水蒸汽一起从排气孔中排出.一般认为当排出的气流很强并有嘘声时,表明锅内的空气已排尽,沸腾后约需5分钟.5. 升压:冷空气完全排尽后,关闭排气阀,继续加热,锅内压力开始上升.6. 保压:当压力表指针达到所需压力时,控制电源,开始计时并维持压力至所需的时间.如本实验中采用0.1Mpa,121.5℃,20分钟灭菌.灭菌的主要因素是温度而不是压力,因此锅内的冷空气必须完全排尽后,才能关闭排气阀,维持所需压力.7. 降压:达到灭菌所需的时间后,切断电源,让灭菌锅温度自然下降,当压力表的压力降至“0”后,方可打开排气阀,排尽余下的蒸汽,旋松螺栓,打开锅盖,取出灭菌物品,倒掉锅内剩水.压力一定要降到“0”后,才能打开排气阀,开盖取物.否则就会因锅内压力突然下降,使容器内的培养基或试剂由于内外压力不平衡而冲出容器口,造成瓶口被污染,甚至灼伤操作者.8. 无菌检查:将已灭菌的培养基放入37℃恒温培养箱培养24h,检查无杂菌生长后,即可使用. (三)过滤除菌有些物质,如抗生素、血清、维生素、糖溶液等采用加热灭菌法时,容易受热分解而被破坏,因而要采用过滤除菌法.过滤除菌是通过机械作用滤去液体或气体中细菌的方法,该方法最大的优点是不破坏溶液中各种物质的化学成分.过滤除菌法除实验室用于溶液、试剂的除菌外,在微生物工作中使用的净化工作台也是根据过滤除菌的原理设计的,可根据不同的需要来选用不同的滤器和滤板材料.应用最广泛的过滤器种类有:1. 微孔滤膜过滤器:是一种新型过滤器,它由上下二个分别具有出口和入口连接装置的塑料盒组成,出口处可连接针头,入口处可连接针筒,使用时将滤膜装入两塑料盒之间,旋紧盒盖,当溶液从针筒注入滤器时,各种微生物被阻留在微孔滤膜上面,而液体和小分子物质通过滤膜,从而达到除菌的目的.其滤膜是由硝酸纤维素、醋酸纤维素等制成的薄膜,有孔径大小不同的多种规格(如0.1μm、0.22μm、0.3μm、0.45μm等),实验室中用于除菌的微孔滤膜孔径一般为0.22μm.根据待除菌溶液量的多少,可选用不同大小的滤器.该滤器的优点是吸附性小,即溶液中的物质损耗少,过滤速度快,每张滤膜只使用1次,不用清洗.2. 蔡氏(Seitz)过滤器:是一种金属制成的过滤漏斗,其过滤部分是一种用石棉纤维和其他填充物压制成的片状结构.溶液中的细菌通过石棉纤维的吸附和过滤而被去除,但对溶液中其他物质的吸附性也大,每张纤维板只能使用1次.3. 玻璃过滤器:是一种玻璃制成的过滤漏斗,其过滤部分是由细玻璃粉烧结成的板状构造.玻璃滤器的规格很多,5号(孔径2~5μm)和6号(孔径
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